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色譜柱的柱效檢測(cè)及保存方法
更新時(shí)間:2020-03-19   點(diǎn)擊次數(shù):2598次

氨基柱的柱效檢測(cè)及保存方法

  氨基柱是指以硅膠作為基質(zhì)載體,鍵合氨基的色譜柱。氨基柱通常用于分析糖類(lèi)化合物,所用流動(dòng)相通常是甲醇、乙腈和緩沖鹽溶液,乙腈相對(duì)使用較多。

  氨基柱使用時(shí)易水解,要注意:

  1.pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),所以應(yīng)嚴(yán)格控制pH范圍;

  2.流動(dòng)相中水的比例越高越有發(fā)生水解的危險(xiǎn);

  所以,在使用后以及準(zhǔn)備長(zhǎng)時(shí)間放置該柱時(shí),必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。

  氨基柱的柱效檢測(cè):

  用于判斷一個(gè)用戶是否有經(jīng)驗(yàn)的指標(biāo)之一,是用戶是否習(xí)慣配制一些柱效檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)溶液。說(shuō)到柱效檢測(cè),來(lái)向大家提供一個(gè)方法,而且很通用,你也可以用同樣的標(biāo)準(zhǔn)溶液和流動(dòng)相來(lái)檢測(cè)硅膠柱和氰基柱。

  流動(dòng)相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0;

  標(biāo)準(zhǔn)溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯;

  檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。

  這個(gè)方法特別適用于新購(gòu)氨基柱時(shí)即進(jìn)行檢測(cè),如有問(wèn)題,可及時(shí)與氨基柱廠家溝通。也適合柱子在準(zhǔn)備放置相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間之前,進(jìn)行充分清洗后進(jìn)行檢測(cè)作為記錄留檔。在平常的使用過(guò)程中,如果分析物是固定重復(fù)的,當(dāng)然可以從對(duì)分析物的分離分析情況來(lái)作出判斷;但如果分析物和分析條件不同時(shí),定期檢測(cè)柱效可以避免柱效下降導(dǎo)致分離不佳再分析查找原因這樣浪費(fèi)人力物力的過(guò)程。特別要注意的是,當(dāng)氨基柱(或氰基柱)在反相條件中使用時(shí),如用該條件檢測(cè),請(qǐng)注意流動(dòng)相的換相過(guò)渡問(wèn)題。

  氨基柱沖洗正相條件下使用的氨基柱就參照硅膠柱的清洗方法;反相條件下使用的氨基柱就參照C18的清洗方法。

  氨基柱的保存:

  1.正相使用時(shí),將柱子沖洗干凈后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。

  2.反相使用時(shí),如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;長(zhǎng)期不用時(shí)需將甲醇依次用異丙醇、CHCl3置換,后用正己烷保存。

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