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液相色譜常見故障的斷定及解決
更新時(shí)間:2015-11-05   點(diǎn)擊次數(shù):2282次

[一]保留時(shí)間變化

  1.柱溫變化 柱恒溫,必要時(shí)需配置恒溫箱

  2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱

  3.緩沖液容量不夠 用25mmol/L的緩沖液

  4.柱污染 每天沖洗柱

  5.柱內(nèi)條件變化 穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相

  6.柱快達(dá)到壽命 采用保護(hù)柱

  [二]保留時(shí)間縮短

  1.流速增加 檢查泵,重新設(shè)定流速

  2.樣品超載 降低樣品量

  3.鍵合相流失 流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向

  4.流動(dòng)相組成變化 防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀

  5.溫度增加 柱恒溫

  [三]保留時(shí)間延長(zhǎng)

  1.流速下降 管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡

  2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化 用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱

  3.鍵合相流失 同前[二]3

  4.流動(dòng)相組成變化 同前[二]4

  5.溫度降低 同前[二]5

  [四] 出現(xiàn)肩峰或分*

  1.樣品體積過大 用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%

  2.樣品溶劑過強(qiáng) 采用較弱的樣品溶劑

  3.柱塌陷或形成短路通道 更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件

  4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效 更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品

  5.進(jìn)樣器損壞 更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子

  [五]鬼峰

  1.進(jìn)樣閥殘余峰 每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗

  2.樣品中未知物 處理樣品

  3.柱未平衡 重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑 [尤其是離子對(duì)色譜]

  4.三fu乙酸[TFA]氧化[肽譜] 每天新配,用抗氧化劑

  5.水污染[反相] 通過變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量,用HPLC級(jí)的水

  [六] 基線噪聲

  1.氣泡[尖銳峰] 流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

  2.污染[隨機(jī)噪聲] 清洗柱,凈化樣品,用HPLC級(jí)試劑

  3.檢測(cè)器燈連續(xù)噪聲 更換氘燈

  4.電干擾[偶然噪聲] 采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來源[如水浴等]

  5.檢測(cè)器中有氣泡 流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

  [七]峰拖尾

  1.柱超載 降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相

  2.峰干擾 清潔樣品,調(diào)整流動(dòng)相

  3.硅羥基作用 加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相PH值,鈍化樣品

  4.同前[四]4 同前[四]4

  5.同前[四]3 5.同前[四]3

  6.死體積或柱外體積過大 連接點(diǎn)降至zui低,對(duì)所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管

  7.柱效下降 用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護(hù)柱

  [八]峰展寬

  1.進(jìn)樣體積過大 同[四]1

  2.在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展 進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散

  3.數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢 設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)

  4.檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過大 設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣*峰半寬的10%

  5.流動(dòng)相粘度過高 增加柱溫,采用低粘度流動(dòng)相

  6.檢測(cè)池體積過大 用小體積池,卸下熱交換器

  7.保留時(shí)間過長(zhǎng) 等度洗脫時(shí)增加溶劑含量也可用梯度洗脫

  8.柱外體積過大 將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至zui小

  9.樣品過載 進(jìn)小濃度小體積樣品

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